技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2023-510
MRC-5細(xì)胞是一種常用的人類胚肺細(xì)胞,是由1966年從一個正常的男性胎兒的肺部組織獲得,具有良好的細(xì)胞生長和增殖特性,可廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、病毒研究和毒性測試等領(lǐng)域。在MRC-5細(xì)胞的培養(yǎng)中,使用的培養(yǎng)基非常關(guān)鍵,不同的培養(yǎng)基可會影響到細(xì)胞的生長和增殖特性。MRC-5細(xì)胞培養(yǎng)基必須包含合適的營養(yǎng)物質(zhì),能量來源和生長因子以確保它們能夠健康地生長和增殖。MRC-5細(xì)胞的培養(yǎng)基主要包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基、補(bǔ)充物以及抗生素。[1640培養(yǎng)基]其中常使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是DMEM/F12(Dul...
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2023-510
為了確保HEK293細(xì)胞培養(yǎng)的穩(wěn)定性和成功性,在使用HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基時,需要注意以下事項。培養(yǎng)液的配制HEK293細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用兩種培養(yǎng)液:DMEM和PMI。在配制培養(yǎng)液時要嚴(yán)格按照說明書來操作,遵循一定的配方和流程。此外,建議在配制時使用熱處理的雙倍溶液,這樣能夠避免配制中出現(xiàn)pH值過高或低的問題。篩選培養(yǎng)基在HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基的篩選過程中,還需要考慮不同穩(wěn)定性和適應(yīng)性的培養(yǎng)基,以便更好地滿足試驗(yàn)要求。例如,當(dāng)進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)時,選擇ProCHO5培養(yǎng)基,可以提高細(xì)胞...
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2023-54
1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細(xì)胞、正?;驉盒栽錾陌准?xì)胞,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium(MEM)也稱非必需培養(yǎng)基,它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單,可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地...
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2023-427
近幾十年以來,隨著生命科技的快速發(fā)展,通過從動物組織中提取細(xì)胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)用以表達(dá)單克隆抗體、新藥開發(fā)等已成為普遍的技術(shù)。細(xì)胞的規(guī)?;瘮U(kuò)培成為新的細(xì)胞培養(yǎng)需求,目前細(xì)胞擴(kuò)增手段主要有:轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)、細(xì)胞工廠和生物反應(yīng)器擴(kuò)培三種方式。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)所面臨的挑戰(zhàn):轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)雖然投資少、結(jié)構(gòu)簡單、技術(shù)成熟、擴(kuò)增只需加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等優(yōu)點(diǎn),但是占地空間大、勞動強(qiáng)度大、產(chǎn)率低、細(xì)胞生長密度低、瓶間差異較難控制等,難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)?;a(chǎn)。生物反應(yīng)器培養(yǎng)雖然可以大大提高細(xì)胞產(chǎn)率但是剪切力會降低細(xì)胞的活率...
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2023-427
體外定點(diǎn)突變技術(shù)是當(dāng)前生物學(xué)各領(lǐng)域研究中的一種重要實(shí)驗(yàn)手段,是改造、優(yōu)化基因的便捷方案,是探索啟動子調(diào)節(jié)位點(diǎn)的有效手段,也是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能之間的復(fù)雜關(guān)系的有力工具。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定其功能,二者之間的關(guān)系是蛋白質(zhì)組研究的重點(diǎn)之一。對某個已知基因的特定堿基進(jìn)行定點(diǎn)改變、缺失或者插入,可以改變對應(yīng)的氨基酸序列和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),對突變基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行研究有助于人類了解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系,探討蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)/結(jié)構(gòu)域。CRISPR-Cas9系統(tǒng)的靶向雙鏈斷裂(DSB),基因組通常通...
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