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DNA 提取實驗中的常見問題解析

分子生物中RNA和DNA提取會常常遇到一些問題，下面小編就RNA和DNA提取實驗中的通常遇到的幾個問題進行解析。1.提取產(chǎn)量低如果您遇到的DNA/RNA產(chǎn)量低于您對樣品的預期，則需要考慮許多因素。通常，這是一個裂解問題。未裂解是產(chǎn)量低的主要原因。它也可能是由不正確的綁定條件引起的。確保使用新鮮的優(yōu)質(zhì)乙醇（100%200標準）稀釋緩沖液或添加到結(jié)合的步驟。劣質(zhì)乙醇或舊庫存可能已經(jīng)吸收了水分，并且濃度不正確。如果洗滌緩沖液制備不正確，您可能正在洗掉提取的DNA或RNA。2.提取低...

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生物實驗室操作技術(shù)規(guī)范

病原微生物實驗操作規(guī)范病原微生物接種的操作規(guī)范：做到以下4點能較大限度地減少接種時氣溶膠的產(chǎn)生。1.打開菌種管時，將安瓿管頸部燒熱，用冷的濕棉球使之突然破裂，才可以大大減小溶膠的產(chǎn)生。2.劃板時，瓊脂平板要選用表面光滑的；接種環(huán)應用彈性小的金屬絲制作，絲桿要短，環(huán)不宜過大，劃板動作要輕。3.接完種后，蘸有菌液的接種環(huán)應在含有消毒液的毛巾上吸干后再放到火焰上灼燒到紅。4.混勻微生物懸液的時候，旋轉(zhuǎn)式搖動，不能左右搖動；搖動時動作輕柔不要使懸液弄濕試管塞。生物樣本移液操作規(guī)范生物...

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生命科學研究中常用的幾種實驗方法

生命科學研究時生物學的分支，下面介紹幾個關(guān)于生命科學常用的幾種實驗方法：一、BCA法測蛋白質(zhì)濃度實驗原理：BCA(bicinchoninicacid，二辛可酸)法測定蛋白質(zhì)即在堿性條件下蛋白質(zhì)與Cu2+絡合，并將其還原成Cu1+。Cu1+和BCA試劑反應使其由原來的蘋果綠形成穩(wěn)定的紫藍色復合物，在562nm有強烈的光吸收，且吸光值和蛋白質(zhì)濃度在廣泛范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，因此可用于蛋白質(zhì)濃度測定。二、免疫組化原理:免疫組織化學，即免疫組化，是應用免疫學基本原理一-抗原抗體反應...

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實時熒光定量 PCR技術(shù)

實時熒光定量PCR，簡稱RT-QPCR,屬于Q-PCR的一種，目前該技術(shù)已得到廣泛應用，如：擴增特異性分析、基因定量分析、基因分型、SNP分析等。熒光定量PCR常用的方法是DNA結(jié)合染料SYBRGreenⅠ的非特異性方法和Taqman水解探針的特異性方法。SYBRGreenI是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有綠色激發(fā)波長的熒光染料，可與所有的各種序列的雙鏈DNA分子結(jié)合。在游離狀態(tài)下，SYBRGreenI發(fā)出微弱的熒光，但一旦與雙鏈DNA結(jié)合，嵌入至dsDNA，熒...

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如何選擇合適的細胞凋亡試劑盒

細胞調(diào)亡是細胞主動死亡的過程，并出現(xiàn)一系列特征變化。包括核固縮、核碎裂、凋亡小體形成，以及DNA特征性片段化、新的基因表達和特定的生物大分子合成等。流式細胞儀可以對不同細胞凋亡的過程進行定性和定量檢測，通過檢測細胞膜完整性來反應細胞凋亡是常用的流式檢測細胞凋亡常用方法之一。其原理是：①用AnnexinV檢測早期凋亡細胞：AnnexinV可以結(jié)合細胞膜上的磷酯酰絲氨酸，磷酯酰絲氨酸位于正常細胞膜內(nèi)側(cè)，不會被檢測到，凋亡時外翻到細胞膜外表面，可以被檢測到。②用PI或者7AAD檢測...

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