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質(zhì)粒dna轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞方法有哪些?質(zhì)粒dna轉(zhuǎn)染真核包主要有以下兩種方法:1.生化方法(1)磷酸鈣介導(dǎo)的質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞1)轉(zhuǎn)染前24h,通過胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基以1×105至4×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿或12孔板上。于含5%~7%CO2的37℃溫箱孵育20~24h。轉(zhuǎn)染前1h換液。2)按照下屬方法制備磷酸鈣-DNA沉淀:于5ml滅菌塑料管內(nèi)混合100μl2.5mol/LCaCl2與25μg質(zhì)粒DNA,如有必要用0.1×TE(pH...
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在生物科學(xué)研究中,單克隆細(xì)胞的篩選和培養(yǎng)是一項(xiàng)基礎(chǔ)而關(guān)鍵的工作。為了得到盡可能多的單克隆細(xì)胞以備篩選,科研人員往往需要增加細(xì)胞鋪板數(shù)量,這無疑增加了很大的工作量。而市面上的一些自動(dòng)化移液工作站雖然能夠減少人為工作量,但是對(duì)于提升鋪板效率,得到更高單克隆細(xì)胞的概率并沒有太大幫助。因此,尋求一種合理且高效的細(xì)胞鋪板工具是非常有需要的。單細(xì)胞鋪板設(shè)備就是一款能夠幫助科研人員減輕工作量,提高工作效率的產(chǎn)品。單細(xì)胞鋪板設(shè)備的主要功能是實(shí)現(xiàn)對(duì)單個(gè)細(xì)胞的精確分離和鋪板。它采用基于圖像的單克...
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單克隆抗體(MonoclonalAntibody,簡稱mAb)是現(xiàn)代生物技術(shù)中的一種重要產(chǎn)品,廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、藥理學(xué)等領(lǐng)域。在過去的幾十年里,隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展,單克隆抗體的制備和應(yīng)用取得了不錯(cuò)的成績。本文將介紹單克隆抗體的篩選方法,以幫助讀者了解這一領(lǐng)域的基本知識(shí),并探討如何利用先進(jìn)技術(shù)提高篩選效率。一、單克隆抗體的制備過程單克隆抗體的制備過程主要包括以下幾個(gè)步驟:1.免疫:將目標(biāo)抗原(如病毒、細(xì)菌、癌細(xì)胞等)注入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(如小鼠、大鼠、兔等)體內(nèi),使其免疫系統(tǒng)...
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在生物制藥領(lǐng)域,CHO(中國倉鼠卵巢)細(xì)胞是常用的宿主細(xì)胞,用于生產(chǎn)重組蛋白藥物。然而,在CHO細(xì)胞的培養(yǎng)過程中,有時(shí)會(huì)遇到細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶后長勢(shì)不佳的問題。這種情況可能會(huì)影響藥物的生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質(zhì)量。本文將分析可能導(dǎo)致CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶后長勢(shì)不佳的原因,并提出相應(yīng)的解決方案。CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶后長勢(shì)不好的原因主要有以下幾點(diǎn):1.環(huán)境變化:細(xì)胞在轉(zhuǎn)瓶過程中,可能會(huì)遇到溫度、濕度、氧氣和二氧化碳濃度等環(huán)境因素的變化。這些變化可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長狀態(tài)產(chǎn)生影響。例如,溫度的波動(dòng)可能導(dǎo)致細(xì)胞代謝途徑的...
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單細(xì)胞分離技術(shù)是一種重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù),它可以幫助科學(xué)家們研究單個(gè)細(xì)胞的特性和功能。在過去的幾十年里,單細(xì)胞分離技術(shù)取得了較大進(jìn)展,其中細(xì)胞鋪板驗(yàn)證儀的應(yīng)用起到了關(guān)鍵的作用。本文將介紹細(xì)胞鋪板驗(yàn)證儀在單細(xì)胞分離技術(shù)中的應(yīng)用。一、單細(xì)胞分離技術(shù)的背景和意義單細(xì)胞分離技術(shù)是指將混合的細(xì)胞群體中的單個(gè)細(xì)胞分離出來的技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中具有重要意義。1.單細(xì)胞分離技術(shù)可以幫助科學(xué)家們研究細(xì)胞異質(zhì)性。在細(xì)胞群體中,不同細(xì)胞的特性和功能可能存在差異。通過單細(xì)胞分離技術(shù),科學(xué)家們...
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